丹參酮 ⅡA 對急性心肌缺血大鼠 S100A1 蛋白表達的影響
吳茂林、翟昌林、張亞梅、吳飛飛、張英志
(1. 浙江蕭山醫院心內科,浙江 杭州 311200 ;2. 嘉興市第一醫院心內科,浙江 嘉興 314000)
[摘 要] 目的 探討丹參酮ⅡA 對大鼠急性心肌缺血損傷后 S100A1 蛋白表達的影響。方法 選擇Wistar 大鼠 60 只,按隨機數字表法分為假手術組、急性心肌缺血模型組、丹參酮ⅡA 預處理組。采用左冠狀動脈(冠脈)前降支根部穿線結扎的方法建立大鼠急性心肌缺血模型;假手術組僅開胸于大鼠左冠脈前降支根部穿線但不結扎;丹參酮ⅡA 預處理組于術前 3 d 腹腔注射丹參酮ⅡA 注射液(劑量為 1.5 mg/kg),假手術組和急性心肌缺血模型組以等體積生理鹽水腹腔注射。采用原位末端缺刻標記法(TUNEL)檢測心肌細胞凋亡情況;檢測血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)及 S100A1 蛋白水平;采用免疫組化染色和蛋白質免疫印跡試驗(Western Blot)檢測心肌組織 S100A1 蛋白的表達水平。結果 與假手術組比較,心肌缺血模型組和丹參酮ⅡA 預處理組心肌細胞凋亡率及 MDA、CK、LDH、S100A1 表達水平均明顯升高,SOD 活性明顯降低 ...
[實驗材料與藥品] 丹參酮ⅡA 注射液購自雅安三九藥業有限公司,批號:121011,每支 2 mL。超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)檢測試盒,人乳酸脫氫酶(LDH)檢測試劑盒,人肌酸激酶(CK)檢測試劑盒,蛋白酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測試劑盒購自上海江萊生物科技有限公司 [1]。原位末端缺刻標記法(TUNEL)試劑盒購自美國Promega 公司,S100A1 和三磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)抗體購自英國Abcam 公司。
[結 果] 心肌細胞凋亡:心肌缺血模型組和丹參酮ⅡA預處理組部分心肌細胞染色呈陽性(棕黃色),呈現形態不規則、與周圍組織脫離和核固縮等特征。假手術組大部分心肌細胞染色呈陰性。丹參酮ⅡA 預處理組細胞凋亡率明顯低于心肌缺血模型組,但兩組均明顯高于假手術組(P<0.05)
免疫組化染色:與假手術組比較,心肌缺血模型組和丹參酮ⅡA 預處理組 S100A1 蛋白染色較深,S100A1 表達水平升高。丹參酮ⅡA 預處理組陽性蛋白少于心肌缺血模型組,表明 S100A1表達水平低于心肌缺血模型組。
[參考文獻]
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[2] 李迎國,楊喜民,唐宗椿,等 . 黃芪注射液對急性重型顱腦損傷患者血清神經元特異性烯醇化酶、髓鞘堿性蛋白和 S100 蛋白B 含量的影響[J]. 中國中西醫結合急救雜志,2007,14(6):337-339.
[3] Remppis A,Pleger ST,Most P,et al. S100A1 gene transfer :a strategy to strengthen engineered cardiac grafts [J]. J GeneMed,2004,6(4):387-394.
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[備 注] [1]“江萊生物”10年以來一直致力于免疫學技術的積累與沉淀,目前江萊生物實驗室占地約3000平米,技術研發團隊50余人,配備了全球最先進的分析和檢測設備,我們通過自主創新以及與國內外的科研單位合作研發,不斷突破新技術,目前我們研發了上千種指標,質量成熟,并長期出口到歐美市場,贏得了眾多科研機構的認可 ...
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