原理
溴甲酚綠于pH4.0環境中,在有外離子去垢劑“
吐溫20”存在時,可與白蛋白形成藍綠色復合物,顏色之深淺與白蛋白含量成正比。
試劑
1、單一試劑
蒸餾水 300毫升
85-90%乳酸 1毫升
溴甲酚綠 50毫克
振搖溶解后加“吐溫20” 1毫升
硫柳汞 50毫克
蒸餾水加至500毫升
2.5mol/L(100g/L)氫氧化鈉或85-90%乳酸調正至pH4.0。在室溫保存,穩定數月。
2、白蛋白標準血清40g/L(0.04g/ml)
注射人血清白蛋白、經消化法或醋酸纖維膜電泳法,測知白蛋白含量,然后用7.7mmol/L(500mg/L)疊氮鈉,稀釋成每毫升含白蛋白0.04克。置冰箱保存。
操作
血清白蛋白測定操作步驟
加入樣本及試劑(ml) |
測定管 |
標準管 |
空白管 |
血清 |
0.05 |
— |
— |
標準血清(40g/L) |
— |
0.05 |
— |
單一試劑 |
5.0 |
5.0 |
5.0 |
混勻、放室內30分鐘后,用630nm或紅色濾光板比色,以空白管校正吸光度至0點,讀取各管吸光度。 |
注意事項
1、比色務于30分鐘內完成。否則影響結果。
2、溴甲酚綠為pH指示劑,其顯色劑的pH值必須為4.0,所以所用器材必須清潔,無酸堿污染,否則對結果影響很大。
3、溴甲酚綠不純時,可按下法提純。即無水乙醇加熱約至60℃,加入溴甲酚綠使達飽和,加入少量活性炭,趁熱過濾,將濾液置冰箱內過夜,待析出結晶,過濾,將結晶干燥后備用。