胎膜早破(PROM)是危害母嬰健康的產科常見病,發病率約占分娩總數的3.03%—21.9%。胎膜破裂后,由于屏障作用消失,將引起:羊膜腔感染、早產、圍產期感染、敗血癥、新生兒窒息等嚴重的并發癥,因此胎膜早破一直受到產科界的關注。但迄今為止,胎膜早破確切的病因及發病機制仍不十分明確。近年來隨著對基質金屬蛋白酶(MMPs)研究的深入,認為MMPs在胎膜早破的發生中起著重要的作用,尤其MMP-9活性的變化與胎膜早破密切相關。目前孕婦血漿中MMP-9水平與胎膜早破的關系,國內外尚未見有關報道。
白介素6(IL-6)屬于炎性細胞因子家族,它參與人體一系列病理生理過程,隨著研究的不斷深入,認為炎性細胞因子參與了MMPs活性的調節。本實驗采用ELISA的方法,分別測定胎膜早破孕婦及正常晚期妊娠婦女血漿、羊水中MMP-9水平和羊水中白介素6(IL-6)水平,及在胎膜早破患者羊水中MMP-9和
白介素6(IL-6)相關性的研究。
以期望能通過本研究探討胎膜破裂的原因和發病機制,為防止胎膜早破的發生尋找一條新途徑.實驗材料和方法選擇胎膜早破患者26例,平均孕期(38.95±1.46)周,平均年齡(27.69±2.62)歲。隨機選取同期住院正常妊娠婦女14例為對照組,平均孕期(38.96±1.53)周,平均年齡(27.7±2.84)歲。以上病例取羊水前均未應用抗生素,且術前體溫均<37.5℃,孕婦心率<100次/分,末梢血白細胞總數<15G/L,且均無規律宮縮。二組病例均無母體疾病,產科并發癥及胎兒、胎位異常。且兩組的孕周、年齡差異均無顯著性(P>0.05)。孕婦血漿標本的采集:所有孕婦均應用EDTA抗凝管廠.sing/llilL取產前肘靜脈血ZInl,常溫下離心15分鐘門X置于一20℃冰箱中保存待測。所有孕婦均在行剖宮產時,用srnl注射器抽取羊水3Inl。常溫下離心10分鐘問000r/minX置于一70℃冰箱中待測。胎膜早破孕婦在產后立即取距胎盤邊緣約scm處胎膜一塊,約Zcmxzcm,迅速放人10%福爾馬林液中固定(至少2小時人常規切片,HE染色。MMP-9由
上海將來商城提供的人的進口分裝ELISA試劑盒。IL-6由上海將來商城提供的人的進口分裝ELISA試劑盒。所有資料用SPSS統計軟件進行統計處理。采用秩和檢驗和Speannan’s等級相關分析。實驗結果胎膜早破孕婦血漿中MMP-9為4222.V 429.37-1006 l)pg/ml。羊水中 MMP9,187.2(38.95-867.54)pg/Inl。二者明顯高于對照組,差異顯著u<O.01人胎膜早破孕婦羊水中IL-6為10.399(2.384-220.93)pg/Inl,明顯高于對照組,差異顯著(P<O.01人母血、羊水中**P-9和羊水中幾一6隨破膜時間的延長,尤其是破膜時間超過12小時者明顯增高。對26例胎 膜早破孕婦行胎膜病理檢查,其中絨毛膜羊膜炎患者6例。破水時間<12L組二例,破水時間>12h組5例。羊水中**P一9和IL一6水平在胎膜早破并發絨毛膜羊膜炎患者與非絨毛膜羊膜炎患者中差異顯著(P<o.05和P<o.01人在胎膜早破孕婦的羊水中MMP-9與
白介素6(IL-6)有明顯的相關性,二者呈正相關,rs=0.748(P< 0.of)。討論人的胎膜是由羊膜、絨毛膜和蛻膜組成,而膠原是細胞外基質的主要成分。膠原具有特定的三螺旋穩定結構,其分解依賴于膠 ·2· 原酶的作用。MMP-9”2KD明酸酶B)是一種鋅依賴的蛋白水解酶,以無活性的酶原形式分泌。可在人體蛻膜、絨毛膜和羊膜產生。主要降解IV型膠原*型膠原和彈性硬蛋白。MMP-9促進包括膠原IV在內的胞外基質的快速崩解引起細胞發生形態學變化和引發凋亡。MMP-9的出現及快速升高預示分娩的開始,分析其活性可預測胎膜破裂。我們的研究結果表明,在胎膜早破孕婦血漿及羊水中MMP-9。明顯高于正常對照組,且差異有顯著性計<O.01人并且我們應用血漿成份,避免了血清中中性粒細胞和單核細胞脫顆粒釋放MMP-9對實驗結果的影響。胎膜的完 整性的保持依賴宮腔內壓與胎膜強度的平衡。由于細胞外基質各 成分的比例決定著胎膜的伸展性和強度,因此從研究結果可以認 為MMP-9的增加,促進了膠原的分解,使胎膜的脆弱性增加,也 增加了胎膜破裂的機會。并且依據約氏指數的計算方法,當血漿中MMP-9以3500pglrnl為分界值時,其預測胎膜早破的敏感度為77%,特異度為93%,羊水中MMP-9以150P砂Inl為分界值 時,其預測胎膜早破的敏感度為62%,特異度為93%。
白介素6(IL-6)是由多種細胞產生的參與免疫反應的細胞因子,發揮局部和全身抗感染作用。
本研究表明,羊水中
白介素6(IL-6)水平在胎膜早破組明顯高于正常對照組。說明胎膜早破的主要原因是源于感染。但并非所有感染的孕婦都有臨床癥狀,本實驗對26例胎膜早破孕婦的胎膜產后行病理檢查,發現絨毛膜羊膜炎者6例p2.92%人且均無臨床癥狀。而在亞臨床感染期主要表現是炎性細胞因子水平和活性的增強。本研究也表明MMP-9和
白介素6(IL-6)成明顯的直線相關。由此可以認為感染因素的存在,可引起炎性細胞因子o-6
關鍵詞:
ELISA,方法,白介素6(IL-6)