目的:探討激活素A對小鼠腹腔巨噬細胞活性的調節作用及其機制.方法:免疫組化觀察
激活素A(ACV-A)在巨噬細胞上的表達,ELISA法檢測小鼠腹腔巨噬細胞培養上清中
ACV-A分泌水平,采用RT-PCR檢測小鼠腹腔巨噬細胞ACV-A mRNA、ActRⅡA mRNA及激活素受體相互作用蛋白2(ActRIP2) mRNA的表達.結果:激活素A可以促進原代培養小鼠腹腔巨噬細胞分泌ACV-A及ACV-A mRNA表達,并呈劑量依賴關系;激活素A對LPS活化的小鼠原代培養腹腔巨噬細胞分泌ACV-A及ACV-A mRNA的表達具有抑制作用,并呈劑量依賴關系.免疫組化染色證實ActRⅡA在巨噬細胞中高表達,激活素A對巨噬細胞表達ActRⅡA mRNA具有促進作用,采用抗ActRⅡA抗體可以阻斷激活素A促進ACV-A mRNA表達作用,進一步檢測表明激活素作用后ActRIP2 mRNA表達亦增加.結論:激活素與LPS比較可能是IL-1分泌的弱激動劑,激活素單獨應用顯示刺激IL-1分泌作用,而與LPS共同作用,則呈現抑制LPS強刺激作用;激活素可能通過ActRIIA-ActRIP2受體信號傳導途徑,調控巨噬細胞ACV-A分泌與合成.
關鍵詞:
ELISA法,檢測,激活素A(ACV-A)