進行光度分析時選擇反應條件,目的是使待測組分在所選擇的反應條件下,能有效地轉變為適于光度測定的化合物。
顯色劑的用量
為保證顯色反應進行完全,一般需加入過量顯色劑,但不是過量越多越好。在保持其他條件不變,僅改變顯色劑用量的情況下,測量顯色溶液的吸光度,吸光度大而又呈現平坦的區域,即是適宜的顯色劑用量范圍。
反應體系的酸度
對于顯色反應溶液的酸度是最重要的條件,同時酸度的影響是多方面的。對某種顯色體系,最適宜的pH范圍與顯色劑、待測元素以及共存組分的性質有關。目前,已有從有關平衡常數值估算顯色反應適宜酸度范圍的報道,但實踐中,仍然是通過實驗來確定。其方法是保持其它實驗條件不變,分別測量不同pH值條件下顯色溶液和空白溶液相對于純溶劑的吸光度,顯色溶液和空白溶液吸光度之差呈現最大而平坦的區域,即為該顯色體系最適宜的pH值范圍。
控制溶液酸度的有效方法是加入適宜的緩沖溶液。緩沖溶液的選擇,不僅要考慮其緩沖pH值范圍和緩沖容量,還要考慮其緩沖溶液陰、陽離子可能引起的干擾效應。
顯色溫度
一般情況下,顯色反應都是在室溫下進行的,溫度的稍許變動影響不大。但有的顯色反應需要在較高的溫度才能較快完成,在這種情況下,要注意反應物和先色舞的熱分解問題。適宜的顯色溫度范圍亦是通過實驗來確定的。
顯色時間
各種顯色反應速率不同,各種顯色化合物的穩定性有差異,顯色溶液達到顏色穩定、吸光度最大所需時間有長有短。因此,需通過實驗,做一定溫度下(如室溫)的吸光度時間曲線,以確定適宜的顯色時間。同時,還要注意顯色物吸光度的穩定時間,必須在顯色溶液吸光度保持最大的時間內完成測定。
溶劑
在選擇顯色反應適宜條件的同時,還需考慮溶劑對顯色反應的影響。有時,由于溶劑的不同生成的顯色化合物顏色不同,水溶液中加入有機溶劑會減少水的介電常數,從而降低配合物的離解度是測定靈敏度提高。例:在水溶液中大部分離解,但加入等體積丙酮后,溶液顯示配合物的天藍色可用于鈷的測定。有時,加入有機溶劑可加快顯色反應速率。