RGS4和D2受體信號通路相關分子在甲基苯丙胺依賴CPP大鼠紋狀體的表達變化

蒙國懿，何繁漪，隋念含，趙林波，洪仕君，邢豫明，趙永娜
（昆明醫科大學藥學院暨云南省天然藥物藥理重點實驗室，法醫學院，昆明650500，云南；云南省公安廳禁毒處毒品技術公安部重點實驗室，昆明650228，云南）

[摘  要]
目的：研究甲基苯丙滕（methamphetamine,METH）依賴條件性位直偏愛（conditioned place prefence, CPP）實驗大鼠紋狀體 G 蛋白信號調節因子 4(regulator of G-protein signal 4, RGS4）和多巴胺 D2受體（dopamine receptor D2）信號通路相關分子的表達變化。方法：建立 METH 依賴 CPP 大鼠 1 周組、2 周組，應用蛋白質印跡（West&shy;ern blot）測定各組大鼠紋狀體 RGS4 和 D2、抑制性 G 蛋白 α 亞基（inhibitory G protein α-subunit, Gαi）、絲裂原激活的蛋白激酶（mitogen-actiyatd protein kinase, MAPK）蛋白表達的變化；應用酶聯免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent as&shy;say, ELISA）測定各組大鼠紋狀體環磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate, cAMP）含量的變化。結果：與生理鹽水對照組相比，METH 依賴 1 周組、2 周組大鼠在伴藥箱的平均停留時間明顯延長（P<0.05）。與生理鹽水對照組相比，RGS4 蛋白在 METH 依賴1周、2周組的表達均明顯下降(P<0.01），且與 METH 依賴 1 周組相比，2 周組的下降更為明顯（P<0.05）... ...

[藥品及主要試劑]
甲基苯丙臟藥片由合作單位云南省公安廳禁毒處毒品分析與禁毒技術公安部重點實驗室合法提供；水合氯醛，購自天津市科密歐化學試劑有限公司；BCA 蛋白濃度測定試劑盒，購自北京天根生化公司；預染蛋自 maker0671，購自Fermentas公司；ECL 化學發光檢測試劑，購自Thermo公司；一抗：鼠抗D2單克隆抗體，購自美國abgent公司；兔抗Gαi 單克隆抗體，購自由abcam公司；兔抗MAPK單克隆抗體，購自美國Cell Signaling公司；兔抗RGS4多克隆抗體，購自美國 abgebt公司；兔抗自β－actin單克隆抗體，購自美國SAB公司；二抗：HRP標記的羊抗兔二抗，購自美國Cell Signaling公司；HRP標記的羊抗鼠二抗，購自美國Cell Signaling公司；大鼠cAMP酶聯免疫分析試劑盒，購自上海江萊生物公司 [1]... ...

[METH  依賴 CPP 大鼠缺狀體 RGS4、D2、Gαi、MAPK  蛋自表達的變化]
與生理鹽水對照組相比，METH  依賴 1 周組、2 周組 RGS4  蛋白表達均明顯下調（P<0.01）； 且與 METH  依賴 1 周組相比，2 周組的下調更為明顯 （P<0.05）。METH 依賴 CPP 大鼠紋狀體中 D2、Gαi 、MAPK 蛋白的表達，與生理鹽水對照組相比，METH 依賴 1 周組、2 周組 D2、Gαi 、MAPK 蛋白表達均明顯上調（P<0.01），且與 METH  依賴 1 周組相比，2 周組的上調更為明顯，差異有統計學意義（P<0.05），見Fig.1

[參考文獻]
[ 1 ] UNODC.  World  Drog Report 2012 [ M ].  United NaChin J Clin Pharmacol Ther 2017 Dec ;22(12 )
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[ 2 ] Grant  KM，Levan，Wells SM，et al.  Methamphet&shy; amine  Associated Psychosis [ J ]. J Neumimmune Pharmacol,  2012 , 7(1) :113-139.
[ 3 ] Maryam R ,  Effat R ,  Nasrin II,  et al.  Effect of electrical stimulation of nucleus  accumhens with low,  median and  high currents intensities on conditioned  place pref erence induced  by  morphine  in  rats [ J ].   Adv  Biomed Res  2014,  3 : 14.
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[備 注] [1]“江萊生物”10年以來一直致力于免疫學技術的積累與沉淀，目前江萊生物實驗室占地約3000平米，技術研發團隊50余人，配備了全球最先進的分析和檢測設備，我們通過自主創新以及與國內外的科研單位合作研發，不斷突破新技術，目前我們研發了上千種指標，質量成熟，并長期出口到歐美市場，贏得了眾多科研機構的認可 ...

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